محمد رضا دارابی، محمد حسین نصراصفهانی،
دوره ۸، شماره ۲ - ( ۵-۱۳۸۴ )
چکیده
مقدمه: امروزه از الکتروفیوژن جنینهای دو سلولی و ایجاد تتراپلوئیدی به عنوان یکی از مهمترین مراحل در بیوتکنولوژی حیوانی نام میبرند، زیرا از جنینهای تتراپلوئید به عنوان بستری جهت رشد و تکوین سلولهای ترانس ژنیک استفاده میگردد. این مطالعه به منظور تعیین اثر سرعت فیوژن ایجاد شده به وسیله تحریک الکتریکی بر میزان تکوین جنینهای تتراپلوئید انجام شد.
روش کار: در این مطالعه تجربی پس از بلوغ تودههای تخمک کومولوس و ۳۵-۳۳ ساعت پس از تلقیح، تعدادی از جنینهای دو سلولی به عنوان گروه کنترل جدا گردید (UCG). مابقی جنینهای دو سلولی به روش الکتروفیوژن تحت تاثیر ولتاژ ۰/۷۵ کیلوولت بر سانتیمتر و زمان ۸۰ میلیونیم ثانیه قرار گرفتند و به محیط SOF۱ منتقل شدند. سپس در زمانهای ۳۰ و ۶۰ دقیقه بعد از الکتروفیوژن، جنینهای فیوز شده (FG) از فیوز نشده (ECG) ، در دو گروه FG۳۰ و FG۶۰ جدا شدند. میزان تکوین جنینها در گروه های FG۳۰ و FG۶۰ و UCG و ECG با هم مقایسه شد و رابطه سرعت فیوژن و میزان تسهیم و تکوین مورد مطالعه قرار گرفت.
نتایج: سرعت تسهیم تا مرحله ۸ سلولی در جنینهای گروه FG۶۰ به طور معنیداری بیشتر از FG۳۰ بود (P<۰/۰۵)، در حالیکه میزان بلاستوسیست در دو گروه تفاوت معنیداری با هم نداشت. میزان تسهیم و تکوین به ترتیب در گروه UCG به طور معنیداری بیش از گروههای ECG و FG۶۰ و FG۳۰ بود. گسترش کروموزومی جنینهای الکتروفیوز شده نیز نشان داد که ۷۶ درصد آنها تتراپلوئید واقعی بودند.
نتیجه گیری: در صورت نیاز به تعداد بیشتری جنینهای ۸ سلولی و کمتر، احتمالاً جنینهای الکتروفیوز شده در گروه FG۶۰ قادرند نسبت به FG۳۰ ، تعداد بیشتری جنین تولید نمایند. توانایی تسهیمی و تکوینی جنینها با تاثیر پالسهای الکتریکی کاهش می یابد.