fa بررسی ایمنی‌زایی واکسن کاندید هدفمند و چند اپی‌توپی 1-HIV در موش‌های بالب سی علوم پایه Basic Sciences پژوهشي اصیل Original Atricle <p style="text-align: justify"><strong>زمینه و هدف</strong>: تحویل مستقیم آنتی‌ژن به سلول‌های دندریتیک موجب تقویت پاسخ‌های ایمنی می‌شود و راهکاری مناسب در مبارزه علیه پاتوژن‌های موتاژنی نظیر HIV می‌باشد. هدف این مطالعه بررسی پاسخ‌های ایمنی حاصل از تحویل مستقیم پروتئین نوترکیب چنداپی‌توپی tat/pol/gag/env ویروس 1-HIV با کمک آنتی بادی منوکلونال علیه 205-DEC موجود در سطح سلول‌های دندریتیک موش جهت تقویت پاسخ‌های ایمنی است.</p> <p style="text-align: justify"><strong>مواد و روش‌ها</strong>: در این مطالعه تجربی- آزمایشگاهی، پروتئین نوترکیب حاصل از بیان پلاسمید pET23a-HIVtop4 حاوی سکانس 20-1Tat، 610-577ENV، 190-150Pol، 323-296ENV، 186-158Gag و 61-44Tat در سویه اشرشیاکلی 21BL به عنوان واکسن مدل استفاده شد. به منظور به‌کارگیری ویژگی‌های سلول‌های دندریتیک در روند ایمنی زایی، پروتئین نوترکیب به روش شیمیایی به آنتی‌بادی علیه گیرنده 205-DEC کونژوگه گردید. موش‌های بالب سی به صورت زیرپوستی با فرم کونژوگه یا غیرکونژوگه (کنترل) پپتید 4HIVtop به همراه Poly I:C به عنوان عامل بلوغ سلول‌های DC، ایمونیزه شدند. تکثیر سلولی به روش برومو دی یوریدین، پاسخ سیتوتوکسیسیتی با اندازه‌گیری گرآنزیم B، اینترلوکین‌های 4 و 7، اینترفرون گاما و آنتی بادی توتال به ترتیب با روش الیزای مستقیم و غیر مستقیم سنجیده شدند.</p> <p style="text-align: justify"><strong>یافته‌ها</strong>: ایمونیزاسیون با پپتید متصل به آنتی بادی علیه 205-DEC در مقایسه با گروه‌های کنترل موجب افزایش قابل ملاحظه در پاسخ‌های تکثیری، سیتوتوکسیسیتی، تولید اینترلوکین‌های 4 و 7، اینترفرون گاما و نیز تیتر آنتی بادی توتال گردید.</p> <p style="text-align: justify"><strong>نتیجه‌گیری</strong>: تحویل مستقیم آنتی ژن پروتئینی مورد نظر به سلول‌های دندریتیک + 205-DEC، در مقایسه با گروه‌های کنترل موجب افزایش قابل توجه پاسخ‌های ایمنی می‌شود.</p> <p style="text-align: justify"><span style="font-size: 14px"><span style="font-family: times new roman"><strong><em>Background</em></strong>: Delivery of antigens directly to dendritic cells enhances the immune responses to the antigen and is an attractive approach for eliciting cellular immune responses against mutagenic pathogens like HIV virus. So the aim of this study is evaluation of immune responses elicited by delivered multi-epitopic HIV-1 tat/pol/gag/env recombinant protein to dendritic cells in sito using &alphaDEC-205 mAb. </span></span></p> <p style="text-align: justify"><span style="font-size: 14px"><span style="font-family: times new roman"><strong><em>Materials and Methods</em></strong>: In this study, recombinant protein expressed by pET23a-HIVtop4 plasmid including HIVtop4 sequence (Gag158-186, Pol150-190, ENV296-323, ENV577-610, Tat1-20 and Tat44-61) in BL21 E. coli cells was used as vaccine model. To exploiting dendritic cells, properties for immunization purposes, we conjugated this recombinant protein chemically to anti body against DEC-205 receptor on these cells. Balb/c mice immunized subcutaneously (s.c.) with conjugated multi-epitopic protein or un-conjugated one (as control) simultaneously with Poly I: C as dendritic cell maturation factor. Lymphocyte proliferation was measured by bromo di uridine assay, Cytotoxicity by Grenzyme B production activity, IL-4, IL-17, IFN- cytokines production and total antibody by direct and indirect ELISA methods in order. </span></span></p> <p style="text-align: justify"><span style="font-size: 14px"><span style="font-family: times new roman"><strong><em>Results</em></strong>: Immunization by anti DEC-205 conjugated peptide led to a significant increase in the proliferative responses of lymphocytes, production of Gr-B, IFN-&gamma, IL-4 and IL-17 cytokines and total antibody titer in comparison with the none targeted groups. </span></span></p> <p style="text-align: justify"><span style="font-size: 14px"><span style="font-family: times new roman"><strong><em>Conclusion</em></strong>: It is concluded that targeting of protein antigens to DEC-205+dendritic cells significantly enhances immune responses in compare to non-targeting strategies.</span></span></p> 205-DEC, هدف‌گیری سلول دندریتیک, پروتئین چنداپی‌توپی نوترکیب, واکسن DEC-205, Dendritic cell targeting, Multi epitopic recombinant protein, Vaccine 46 58 http://jams.arakmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2996-1&slc_lang=fa&sid=1 Roghayeh Rahimi رقیه رحیمی rahimiimmune@gmail.com 4600319475328460043405 4600319475328460043405 No Department of Immunology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran گروه ایمنی شناسی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران Mehdi Mahdavi مهدی مهدوی 4600319475328460043406 4600319475328460043406 No Department of Immunology, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran گروه ایمنی شناسی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران Massoumeh Ebtekar معصومه ابتکار ebtekarm@modares.ac.ir 4600319475328460043407 4600319475328460043407 Yes Department of Immunology, Faculty of Medical Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran گروه ایمنی شناسی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران