Journal of Arak University of Medical Sciences
مجله دانشگاه علوم پزشكي اراك
J Arak Uni Med Sci
Medical Sciences
http://jams.arakmu.ac.ir
46
journal46
1735-5338
2008-644X
fa
jalali
1394
3
1
gregorian
2015
6
1
18
3
online
1
fulltext
fa
تشخیص مولکولی ویروس پاپیلومای انسانی (HPV) با استفاده از PCR اختصاصی بر روی ژن L1 و بررسی فراوانی آن در نمونههای بافتی بیماران مبتلا به سرطان دهانه رحم
Molecular Recognition of Human Papilloma Virus (HPV) Using Proprietary PCR Method Based on L1 Gene and the Evaluation of its Frequency in Tissue Samples from Patients with Cervical Cancer
عمومى
General
پژوهشي اصیل
Original Atricle
<p style="text-align: justify"><strong>زمینه و هدف</strong>: در سال 1970 میلادی، ویروس پاپیلومای انسانی (HPV) به عنوان عامل اصلی بروز سرطان دهانه رحم معرفی شد. از آن جا که با استفاده از روش‏های سرولوژیک و کشت سلولی، امکان تشخیص این ویروس و انواع آن وجود ندارد، روش های مولکولی از جمله PCR در تشخیص دقیق، قطعی و زودهنگام این ویروس از اهمیت ویژه‏ای برخوردار هستند. لذا هدف از این پژوهش، استفاده از یک سنجش PCR اختصاصی بر روی ژن L1 ویروس پاپیلومای انسانی، جهت تشخیص مولکولی HPV و بررسی وفور آن در نمونه‏های بیمار می‏باشد.</p>
<p style="text-align: justify"><strong>مواد و روش‏ها</strong>: در این مطالعه تجربی، پس از جمع‏آوری نمونه از ضایعات بدخیم دهانه رحم بیماران مختلف، DNA ویروسی از بلوک‏های پارافینی 50 نمونه بالینی، استخراج شد و PCR با پرایمرهای اختصاصی ژن L1 ویروس پاپیلومای انسانی، بر روی نمونه‏های فوق انجام گرفت و پس از بررسی محصولات PCR تولید شده بر روی ژل آگارز 2 درصد، حساسیت و اختصاصیت این تست نیز مورد ارزیابی قرار گرفت.</p>
<p style="text-align: justify"><strong>یافته‏ها</strong>: از میان 50 نمونه بیمار، 33 مورد از نظر وجود عفونت HPV مثبت و 17 مورد HPV منفی بودند که حاکی از فراوانی بالای HPV در این جمعیت بیمار (حدود 66 درصد) بود. نتایج ارزیابی اختصاصیت برای نمونه‏های پاپیلوما مثبت بوده و حساسیت این تست، 20 نسخه از سازه نوترکیب حاوی L1 به ازای هر واکنش بود.</p>
<p style="text-align: justify"><strong>نتیجه‏گیری</strong>: این مطالعه نشان داد که PCR با پرایمرهای اختصاصی بر روی ژن L1 روشی مناسب و دقیق برای ردیابی ویروس پاپیلومای انسانی است و این یافته‏ها موید گزارش های پیشین مبنی بر ارتباط میان HPV و سرطان دهانه رحم است.</p>
<p dir="ltr" style="text-align: justify"><span style="font-size: 14px"><span style="font-family: times new roman"><em><strong>Background</strong></em>: In 1970, human papillomavirus (HPV) was introduced as the main etiologic factor of cervical carcinoma. Since there is no possibility of detecting the virus and its subtypes using serological methods and cell culture, the molecular methods such as PCR have particular importance in accurate, early and definite diagnosis of the virus. So, in this research, our goal is to use a proprietary PCR assay based on L1 gene of human papillomavirus for molecular recognition of HPV and to evaluate its prevalence in patient samples.</span></span></p>
<p dir="ltr" style="text-align: justify"><span style="font-size: 14px"><span style="font-family: times new roman"><em><strong>Materials and Methods</strong></em>: In this experimental study, after collecting of samples from malignant cervical lesions, the viral DNA was extracted from paraffin blocks of 50 clinical samples and PCR was done by specific primers for L1 gene of human papillomavirus in all samples. After the analysis of PCR products by 2% agarose gel electrophoresis, sensitivity and specificity of the test were also evaluated.</span></span></p>
<p dir="ltr" style="text-align: justify"><span style="font-size: 14px"><span style="font-family: times new roman"><em><strong>Results</strong></em>: Among 50 patient samples, 33 cases were confirmed to be positive for HPV infection and 17 cases were negative, showing high frequency of HPV in this patient population (about 66%). The results of specificity assay were positive for papilloma samples and sensitivity of the assay was 20 copies of recombinant construct containing L1 per reaction.</span></span></p>
<p dir="ltr" style="text-align: justify"><span style="font-size: 14px"><span style="font-family: times new roman"><em><strong>Conclusion</strong></em>: This study showed that PCR by specific primers for L1 gene of human papilloma virus is a proper and accurate method for detection of this virus and the results confirm the previous reports of correlation between HPV and cervical carcinoma.</span></span></p>
Cancer of cervix, Human papilloma virus, PCR
28
36
http://jams.arakmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3170-4&slc_lang=fa&sid=1
Roohollah
Dorostkar
روح اله
درستکار
R.dorost@yahoo.com
4600319475328460068328
4600319475328460068328
Yes
Applied Virology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran
مرکز تحقیقات ویروس شناسی کاربردی، دانشگاه و پژوهشگاه علوم پزشکی بقیه الله الاعظم (عج)، تهران، ایران
Mohammad Sadegh
Hashemzadeh
محمدصادق
هاشم زاده
4600319475328460068329
4600319475328460068329
No
Applied Virology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran
مرکز تحقیقات ویروس شناسی کاربردی، دانشگاه و پژوهشگاه علوم پزشکی بقیه الله الاعظم (عج)، تهران، ایران
Mahdi
Tat
مهدی
تات
eslami@royaninstitute.org
4600319475328460068330
4600319475328460068330
No
Applied Virology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran
مرکز تحقیقات ویروس شناسی کاربردی، دانشگاه و پژوهشگاه علوم پزشکی بقیه الله الاعظم (عج)، تهران، ایران
Mohammad Raza
Shafaati
محمدرضا
شفاعتی
4600319475328460068331
4600319475328460068331
No
Applied Virology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran
مرکز تحقیقات ویروس شناسی کاربردی، دانشگاه و پژوهشگاه علوم پزشکی بقیه الله الاعظم(عج)، تهران، ایران
Mohammad
Najarasl
محمد
نجاراصل
4600319475328460068332
4600319475328460068332
No
Applied Virology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran
مرکز تحقیقات ویروس شناسی کاربردی، دانشگاه و پژوهشگاه علوم پزشکی بقیه الله الاعظم (عج)، تهران، ایران
Samaneh
Zahiri Yeganeh
سمانه
ظهیری یگانه
4600319475328460068333
4600319475328460068333
No
Applied Virology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran
مرکز تحقیقات ویروس شناسی کاربردی، دانشگاه و پژوهشگاه علوم پزشکی بقیه الله الاعظم(عج)، تهران، ایران