fa روش تشخیص سریع‌تر عفونت لیشمانیا با استفاده از تکنیکPCR و FLASH PCR علوم پایه Basic Sciences پژوهشي اصیل Original Atricle <p dir="RTL" style="margin-right: 28.9pt; text-align: justify;"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family: nasimyw;"><strong>چکیده</strong></span></span></p> <p dir="RTL" style="margin-right: 28.9pt; text-align: justify;"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family: nasimyw;"><strong>زمینه وهدف</strong>: لیشمانیوز یک بیماری انگلی تک یاخته‌ای است که به عنوان یک معضل بهداشتی در بسیاری از کشورها مطرح است.هدف از این مطالعه، تشخیص عفونت انگل در انسان به منظور شناسایی اپیدمیولوژیک و ارائه برنامه کنترل با استفاده از پرایمر اختصاصی مشترک طراحی شده در سه گونه لیشمانیا است.</span></span></p> <p dir="RTL" style="margin-right: 28.9pt; text-align: justify;"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family: nasimyw;"><strong>مواد و روش‌ها</strong>:30 نمونه ایزوله شایع انگل لیشمانیا از مراکز مختلف در ایران جمع آوری شد. <span dir="LTR">DNA</span> این ایزوله‌ها پس از کشت در محیط <span dir="LTR">Rpmi1640 </span>استخراج و ژن <span dir="LTR">ITS2-rRNA</span> با استفاده از <span dir="LTR">PCR </span>تکثیر یافت. امپلیکون‌ها توسط الکتروفورز در ژل آگارز 2 درصد مورد بررسی قرار گرفتند. از روش <span dir="LTR">FLASH PCR</span> نیز، یک پروب اختصاصی و رنگ فلورسانس به منظور بررسی وجود یا عدم وجود امپلیکون به کار گرفته شد.</span></span></p> <p dir="RTL" style="margin-right: 28.9pt; text-align: justify;"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family: nasimyw;"><strong>یافته‌ها:</strong> نتایج حاصل از روش‌های<span dir="LTR">PCR </span>&nbsp;و &nbsp;<span dir="LTR">FLASH PCR</span>نشان می‌دهند این دو روش دارای دقت و حساسیت قابل قبولی برای شناسایی لیشمانیا هستند.</span></span></p> <p dir="RTL" style="margin-right: 28.9pt; text-align: justify;"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family: nasimyw;"><strong>نتیجه‌گیری</strong>: تعیین آلودگی انگل لیشمانیا با استفاده از جفت پرایمر اختصاصی موفقیت‌آمیز بود و روش <span dir="LTR">TaqMan</span> می‌تواند یکی از حساس‌ترین روش‌های تشخیصی برای شناسایی کیفی انگل در ناحیه‌ی <span dir="LTR">ITS2</span> لیشمانیا باشد.</span></span></p> <p style="text-align: justify"><span style="font-size: 14px"><span style="font-family: times new roman"><strong><em>Background:</em></strong> Leishmaniasis is a protozoan parasitic disease and a global health problem. The aim of this study is to diagnose the parasitic infection in humans for epidemiological identification and providing control programs using proprietary co-designed primers in three species of Leishmania.</span></span></p> <p style="text-align: justify"><span style="font-size: 14px"><span style="font-family: times new roman"><strong><em>Materials and Methods:</em></strong> 30 common Leishmania isolates were gathered from different centers in Iran. Having been cultured in RPMI-1640 Medium, DNA was extracted and the gene&nbsp; &nbsp;ITS2-rRNA was amplified by PCR. The amplicons were examined by electrophoresis on agarose gel 2%. Also, in FLASH PCR method, a specific probe and florence colour were used to investigae the amplicon existence on sample.</span></span></p> <p style="text-align: justify"><span style="font-size: 14px"><span style="font-family: times new roman"><strong><em>Results:</em></strong> The results of the investigations by PCR and FLASH PCR methods show that these methods are sensitive and specific for diagnosis of Leishmania</span></span></p> <p style="text-align: justify"><span style="font-size: 14px"><span style="font-family: times new roman"><strong><em>Conclusion:</em></strong> In this study, identification of Leishmania parasite using specific primer pairs was successful and TaqMan could be one of the most sensitive diagnostic methods to identify parasite load for the ITS2 region of Leishmania<span dir="rtl">.</span></span></span></p> لیشمانیاPCR , ITS2-rRNA, FLASH PCR FLASH PCR, ITS2-rRNA, Leishmania, PCR 79 86 http://jams.arakmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4543-1&slc_lang=fa&sid=1 Alireza Moradabadi علیرضا مرادآبادی alirezamoradabadi@yahoo.co.uk 4600319475328460053229 4600319475328460053229 No Department of Hematology and Laboratpry Sciences, Kerman University of Medical Sciences, Kerman, Iran گروه خون‌شناسی و علوم آزمایشگاهی، دانشگاه علوم پزشکی کرمان، کرمان، ایران Alireza Farsinezhad علیرضا فارسی نژاد alireza.mrd39@gmail.com 4600319475328460053230 4600319475328460053230 No PhD of Hematology, Department of Hematology, Pathology and Stem Cell Research Center, Kerman University of Medical Sciences, Kerman, Iran دکترای تخصصی هماتولوژی، گروه هماتولوژی، مرکز تحقیقات پاتولوژی و سلول‌های بنیادی، دانشگاه علوم پزشکی کرمان، کرمان، ایران Maryam Fekri Soofiabadi مریم فکری صوفی آبادی fekri.m1982@yahoo.com 4600319475328460053231 4600319475328460053231 Yes MSc in Biochemistry, Department of Pathology, Pathology and Stem Cell Research Center, Kerman University of Medical Sciences, Kerman, Iran کارشناس ارشد بیوشیمی،گروه پاتولوژی، مرکز تحقیقات پاتولوژی و سلول‌های بنیادی، دانشگاه علوم پزشکی کرمان، کرمان، ایران