fa جداسازی و شناسایی سویه های تولیدکننده مواد فعال ضدمیکروبی در طی غربال‌گری باکتری‌های گرم‌مثبت تشکیل‌دهنده‌ی آندوسپور هالوفیل جداشده از دریاچه‌های شورایران علوم پایه Basic Sciences پژوهشي اصیل Original Atricle <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:14px;"><strong><span style="font-family: b mitra;">چکیده</span></strong><br> <strong><span style="font-family: b mitra;">زمینه و هدف</span></strong><span style="font-family: b mitra;">: امروزه، با توجه به رشد روزافزون مقاومت ضدمیکروبی، کشف و تولید داروهای ضدمیکروبی جدید مورد تأکید است.</span> <span style="font-family: b mitra;">هدف از این مطالعه، بررسی باکتری</span><span dir="LTR"><span style="font-family: calibri, sans-serif;">‌</span></span><span style="font-family: b mitra;">های هالوفیل یا هالوتالرنت تولیدکننده</span><span dir="LTR"><span style="font-family: calibri, sans-serif;">‌</span></span><span style="font-family: b mitra;">ی آندوسپور جداشده از مناطق مختلف ایران به‌منظور غربال&shy;گری گونه‌های</span> <span style="font-family: b mitra;">تولیدکننده مواد فعال ضدمیکروبی است. </span><br> <strong><span style="font-family: b mitra;">مواد و روش‌ها:</span></strong> <span style="font-family: b mitra;">تعداد 62 ایزوله از دریاچه‌های شور مختلف ایران جداسازی شدند، تولید آندوسپور مورد بررسی قرار گرفت و شناسایی تکمیلی با استفاده از توالی‌یابی ژن </span><span dir="LTR">16S rRNA</span><span style="font-family: b mitra;"> انجام شد. غربال&shy;گری به روش دو لایه در محیط‌کشت آگار به‌گونه‌ای انجام شد که دو باکتری اندیکاتور باسیلوس سرئوس (</span><span dir="LTR">ATCC 14579</span><span style="font-family: b mitra;">) و اشرشیا کلی (</span><span dir="LTR">PTCC 1330</span><span style="font-family: b mitra;">) در لایه‌ی بالایی تلقیح شدند. در انتها تولید ماده‌ی فعال ضدمیکروبی در یک دوره زمانی هفت روزه مورد بررسی قرار گرفت و در ادامه اثر غلظت آگار در لایه‌ی پایینی بر انتشار متابولیت ضدباکتریایی مطالعه شد.</span><br> <strong><span style="font-family: b mitra;">یافته‌ها:</span></strong> <span style="font-family: b mitra;">سویه‌های </span><span dir="LTR">&nbsp;WT6</span><span style="font-family: b mitra;">و </span><span dir="LTR">R4A19</span><span style="font-family: b mitra;"> با تولید ماده ضدمیکروبی رشد هر دو باکتری باسیلوس سرئوس و ایشرشیا کلی را مهار کردند</span><span dir="LTR">.</span><span style="font-family: b mitra;"> هاله‌ی عدم رشد فقط بر علیه اشرشیا کلی، زمانی‌که سویه‌ی </span><span dir="LTR">R4A20</span><span style="font-family: b mitra;"> در لایه‌ی پایینی کشت داده شده بود، مشاهده شد؛ درحالی‌که چهار سویه </span><span dir="LTR">R4S2</span><span style="font-family: b mitra;">، </span><span dir="LTR">LbS2</span><span style="font-family: b mitra;">، </span><span dir="LTR">RF1</span><span style="font-family: b mitra;"> و </span><span dir="LTR">WT19</span><span style="font-family: b mitra;"> فقط توانستند رشد باسیلوس سرئوس را مهار کنند. حداکثر تولید ماده فعال ضد‌میکروبی برای سویه </span><span dir="LTR">WT6</span><span style="font-family: b mitra;"> علیه باسیلوس سرئوس و اشرشیا کلی به‌ترتیب بعد از روز سوم و چهارم به‌دست آمد، درحالی</span><span dir="LTR"><span style="font-family: calibri, sans-serif;">‌</span></span><span style="font-family: b mitra;">که سویه‌ی </span><span dir="LTR">R4A20</span><span style="font-family: b mitra;"> ماده‌ی فعال را پس از 5 روز به تولید بهینه رساند. در اندازه شعاع هاله عدم‌ رشد در غلظت‌های متفاوت آگارِ موجود در لایه‌ی پایه، تفاوت معناداری مشاهده نشد.</span><br> <strong><span dir="RTL"><span style="font-family: b mitra;">نتیجه‌گیری:</span></span></strong><span dir="RTL"><span style="font-family: b mitra;"> باکتری‌های هالوفیل یا هالوتالرنت تولید‌کننده آندوسپور جداشده از نقاط مختلف ایران به عنوان میکروارگانیسم&shy; های ضدباکتریایی جالب، ارزش بررسی و تحقیق بیشتری دارند. </span></span></span></div> <div style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><span style="font-size: 14px;"><strong>Abstract</strong><br> <strong><em>Background:</em></strong> Today, discovery and production of new antimicrobial drugs has been emphasized due to the growing of antimicrobial resistance. The purpose of this study was to screen out antimicrobial producing bacteria among halophilic or halotolerant Gram-positive endospore-forming bacteria isolated from different areas of Iran.<br> <strong><em>Materials and Methods:</em></strong> 62 strains were isolated from salin lakes of Iran, endospore-forming ability was evaluated and further identification of strains was done using 16S rRNA gene sequencing. Screening test was performed using two-layer agar diffusion method in which the indicator strains, <em>Bacillus cereus</em> (ATCC 14579) and <em>Escherichia coli</em>, (PTCC 1330) were inoculated in the seed layer. Finally, the production of antimicrobial active agent during a period of 7 days was studied followed by evaluating the effect of base-layer agar concentration on the dissemination of antibacterial metabolite.<br> <strong><em>Results:</em></strong> Isolates WT6, R4A19 produced an agent(s) which inhibited the growth of both <em>B.cereuse</em> and <em>E.Coli</em>. The inhibition zone against only <em>E.Coli</em> was observed when R4A20 strain had been cultured in the base layer, while four non-bacillus strains (R4S2, LbS2, RF1 and WT19) could inhibit the growth of <em>B.cereuse</em>. The antibacterial compound production of WT6 against <em>Bacillus cereuse</em> and <em>E.Coli</em> reached to its optimumm leved after 3 and 4 days respectively, while R4A20 produced the active substance, optimally, after 5 days. No significant difference effect on diameter of zone inhibition was observed among various base-layer agar concentrations.<br> <strong><em>Conclusion:</em></strong> Halophile or halotolerant endospore-forming bacteria isolated from different areas of Iran possess a potential to be considered as interesting microorganisms for further antimicrobial research studies.</span></span><br> &nbsp;</div> ماده فعال ضدباکتریایی, باکتری‌های تولیدکننده‌ی آندوسپور, هالوفیل‌ها, تحمل شوری, ایران Antibacterial agents, Endospore Forming bacteria, Halophiles saline tolerance, Iran 10 23 http://jams.arakmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-5274-1&slc_lang=fa&sid=1 Asefeh Dahmardeh Ghalehno آصفه ده مرده قلعه نو DahmardehA941@mums.ac.ir 4600319475328460060189 4600319475328460060189 No School of Pharmacy, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran. دانشکده داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران Maryam Ghavidel-Aliabadi مریم قوی دل علی آبادی naser_bio@yahoo.com 4600319475328460060190 4600319475328460060190 No School of Pharmacy, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran. دانشکده داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران Zeinab Shahmohamadi زینب شاه محمدی Shahmohamadiz841@mums.ac.ir 4600319475328460060191 4600319475328460060191 No School of Pharmacy, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran. دانشکده داروسازی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران Maliheh Mehrshad ملیحه مهرشاد chaji.ml@gmail.com 4600319475328460060192 4600319475328460060192 No Extremophiles Laboratory, Department of Microbiology, Faculty of Biology, University of Tehran, Tehran, Iran. آزمایشگاه اکسترویموفیل‌ها، گروه میکروبیولوژی، دانشکده زیست‌شناسی، دانشگاه تهران، تهران، ایران Mohammad ali Amoozegar محمدعلی آموزگار amozegar@khayam.ut.ac.ir 4600319475328460060193 4600319475328460060193 No Extremophiles Laboratory, Department of Microbiology, Faculty of Biology, University of Tehran, Tehran, Iran. آزمایشگاه اکسترویموفیل‌ها، گروه میکروبیولوژی، دانشکده زیست‌شناسی، دانشگاه تهران، تهران، ایران Abolghasem danesh ابوالقاسم دانش DaneshA@mums.ac.ir 4600319475328460060194 4600319475328460060194 Yes Biotechnology Research Center, Pharmaceutical Technology Institute, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran. مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، پژوهشکده علوم نوین دارویی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران