Journal of Arak University of Medical Sciences
مجله دانشگاه علوم پزشكي اراك
J Arak Uni Med Sci
Medical Sciences
http://jams.arakmu.ac.ir
46
journal46
1735-5338
2008-644X
fa
jalali
1391
1
1
gregorian
2012
4
1
15
1
online
1
fulltext
fa
تشخیص فنوتیپی و ملکولی بتالاکتامازهای TEM، PER و VEB در سویههای بالینی اشریشیاکلی
Phenotypic and molecular detection of TEM, PER, and VEB beta-lactamases in clinical strains of Escherichia coli
علوم پایه
Basic Sciences
پژوهشي اصیل
Original Atricle
زمینه و هدف: آنزیمهای بتالاکتاماز TEM، VEBو PERاز آنزیمهای بتالاکتاماز وسیعالطیف هستند که قادر به هیدرولیز پنیسیلینها، سفالوسپورینها و آزترئونام میباشند. هدف از این بررسی تعیین فراوانی اشریشیاکلیهای تولیدکننده بتالاکتاماز وسیعالطیف و ارزیابی مولکولی بتالاکتامازهای TEM، PER و VEB در سویههای باکتری اشیرشیاکلی بود.
مواد و روشها: تعداد 200 سویه اشریشیاکلی از نمونههای کلینیکی جدا شد و حساسیت آنتیبیوتیکی سویهها با روش دیسک دیفیوژن تعیین گردید. تولید آنزیمهای بتالاکتاماز وسیعالطیف با استفاده از روش دیسک ترکیبی و با آنتیبیوتیکهای سفوتاکسیم و سفتازیدیم همراه با کلاولانیک اسید و به تنهایی تعیین گردید و حداقل غلظت مهار کنندگی سفتازیدیم و سفوتاکسیم همراه با کلاولانیک اسید و به تنهایی با استفاده از روش رقیق سازی آگار مشخص شد. در نهایت حضور ژنهای blaTEM،blaVEB و blaPER با استفاده از پرایمرهای اختصاصی توسط روش واکنش زنجیرهای پلی مراز شناسایی گردید.
یافتهها: با آزمون دیسک ترکیبی 94 سویه (47 درصد) تولید کننده آنزیم بتالاکتاماز وسیعالطیف بودند. از بین 94 سویه تولیدکننده بتالاکتاماز وسیعالطیف حداقل غلظت مهار کنندگی برای سفتازیدیم در 36 نمونه 16، در 44 نمونه 256-32 و در 10 نونه 512≤ و حداقل غلظت مهار کنندگی برای سفوتاکسیم در 8 نمونه 16، در 68 نمونه 256-32 و در 21 نمونه512≤ مشخص شد. فراوانی آنزیم TEM 44 درصد به دست آمد، اما در سویههای تولیدکننده بتالاکتاماز وسیعالطیف ژنهای کد کننده آنزیمهای PER و VEBشناسایی نشد.
نتیجهگیری: تولید آنزیمهای بتالاکتاماز وسیعالطیف در سویههای مورد مطالعه، 47 درصد است و روش واکنش زنجیرهای پلی مراز فراوانی بالایی از آنزیم TEM را نشان داد ولی آنزیمهای PER و VEB خوشبختانه هنوز در سویههای مورد بررسی مشاهده نمیشوند.
Background: TEM, PER, and VEB are extended-spectrum betalactamase (ESBL) enzymes that are capable of hydrolyzing penicillins, cephalosporins, and aztreonam. The aim of this study was to determine the prevalence of ESBL producing E.coli and molecular evaluation of TEM, PER, and VEB β-lactamases among E.coli strains.
Materials and Methods: A total of 200 clinical strains of E.coli were isolated from clinical specimens and their antibiotic susceptibility was determined by disk diffusion method. ESBL production was determined using the combined disk method with CAZ and CTX with clavulanic acid and alone. Minimum concentration inhibition (MIC) for CAZ and CTX with clavulanic acid and alone was determined by agar dilution method. Finally, PCR with specific primers was used for determining the presence of blaTEM, blaPER, and blaVEB genes.
Results: Combined disk method confirmed 94 strains (47%) to be ESBL producing E.coli. Of the 94 ESBL producing strains, 36 samples had MIC=16, 44 samples had MIC between 32-256, and 10 samples had MIC≥512 for ceftazidime, whereas 8 samples had MIC=16, 68 samples had MIC between 32-256, and 21 samples had MIC≥512 for cefotaxime. The frequency of TEM was 44% however, blaPER and blaVEB genes were not detected by PCR among ESBL producing isolates.
Conclusion:The results indicated that the high percentage of ESBL producing E.coli is 47% and PCR method showed a high frequency of TEM enzyme, but PER and VEB betalactamase were not found among them.
بتالاکتاماز، دیسک ترکیبی، بتالاکتاماز وسیعالطیف، اشریشیاکلی
Beta-lactamase, Combined disk, ESBL, Escherichia coli
1
9
http://jams.arakmu.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-733-1&slc_lang=fa&sid=1
Majid
Eslami
مجید
اسلامی
majid.eslami@modares.ac.ir
4600319475328460020180
4600319475328460020180
No
Shahin
Najar Peerayeh
شهین
نجار پیرایه
najarp_s@modares.ac.ir
4600319475328460020181
4600319475328460020181
Yes