دوره 15، شماره 5 - ( ماهنامه مهر 1391 )
جلد 15 شماره 5 صفحات 65-58 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Najafi S, Behzadian F, Fotuhi F, Fallah Mehrabadi J. Construction of a recombinant bacmid DNA in order to express Neuraminidase gene of influenza virus H1N1. J Arak Uni Med Sci 2012; 15 (5) :58-65
URL: http://jams.arakmu.ac.ir/article-1-1314-fa.html
URL: http://jams.arakmu.ac.ir/article-1-1314-fa.html
نجفی سارا، بهزادیان فریدا، فتوحی فاطمه، فلاح مهرآبادی جلیل. جداسازی و کلونینگ ژن نورآمینیداز ویروس آنفلوانزا A (H1N1 سویهNew Caledonia ) در وکتور بکمید به منظور ساخت باکیولوویروس نوترکیب. مجله دانشگاه علوم پزشكي اراك. 1391; 15 (5) :58-65
سارا نجفی1 
، فریدا بهزادیان 2، فاطمه فتوحی3 ، جلیل فلاح مهرآبادی4
، فریدا بهزادیان 2، فاطمه فتوحی3 ، جلیل فلاح مهرآبادی4
1- دانشگاه آزاد
2- پژوهشکده علوم و فناوری زیستی، اتوبان شهید بابایی، خیابان شهید شعبانلو، لویزان، صندوق پستی 1774-15875 ، fbehzadian@yahoo.com
3- انستیتو پاستور
4- دانشگاه آزاد اسلامی واحد مینودشت
2- پژوهشکده علوم و فناوری زیستی، اتوبان شهید بابایی، خیابان شهید شعبانلو، لویزان، صندوق پستی 1774-15875 ، fbehzadian@yahoo.com
3- انستیتو پاستور
4- دانشگاه آزاد اسلامی واحد مینودشت
چکیده: (11197 مشاهده)
زمینه و هدف: در سالهای اخیر ویروس آنفلوانزا باعث عفونتهای متوسط تا شدید با میزان پراکندگی وسیع در سرتاسر دنیا شده است. بر این اساس، واکسن آنفلوانزایی که تنها یک دوز آن محافظت ایجاد نماید هنوز در دسترس نیست. بنابراین، تهیه یک واکسن عمومی و فراگیر بر اساس ذرات شبه ویروسی غیرتکثیری ایدهال میباشد. در تحقیق حاضر یکی از سازههای مولکولی برای ساخت این ذرات مد نظر قرار گرفته است. مواد و روشها: در این مطالعه تجربی، رده سلولی MDCK برای تکثیر ویروس آنفلوانزای انسانی تیپ A/New Caledonia H1N1 استفاده شد. سپس کل RNA سلول، استخراج شده و با استفاده از پرایمر random hexamer به عنوان پرایمر عمومی cDNA ساخته شد. قطعه (1413 bp)NA با روش PCR تکثیر داده شد و در وکتور pBluescript SK کلون شد. سپس قطعه نورآمینیداز در پلاسمید pFastBac11 از طریق محلهای برش آنزیمی SalI و XhoI سابکلون گردیده و صحت آن با توالییابی دو طرفه مورد تایید قرار گرفت. وکتور pFastBac1NA به میزبان E.coli DH10Bac که حاوی بکمید و پلاسمید کمکی بود منتقل شد تا بکمید نوترکیب نورآمینیداز ساخته شود. یافتهها: بکمید نوترکیب نورآمینیداز با روش نوترکیبی هومولوگ بین pFastBac1NA و بکمید به وجود آمد. این محصول با استفاده از PCR و پرایمرهای اختصاصی نورآمینیداز و عمومی M13 تایید گردید. نتیجهگیری: از بکمید نوترکیب ساخته شده در این مطالعه به همراه بکمیدهای نوترکیب، حاوی سایر ژنهای ساختمانی ویروس، میتوان برای ساخت ذرات شبه ویروسی آنفلوانزا استفاده نمود و یا پروتئین حاصل از بیان این سازه را در سلولهای حشرات خالص نموده و در تحقیقات واکسن شناسی استفاده نمود.
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
