دوره 15، شماره 9 - ( ماهنامه بهمن 1391 )
جلد 15 شماره 9 صفحات 60-51 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Rezaee M, Honari H, Zand A M, Arefpour torabi M A. Recombinant expression and purification of Bacillus anthracis lethal factor domain 1 in Escherichia coli and production of polyclonal antibody against it in mice . J Arak Uni Med Sci 2013; 15 (9) :51-60
URL: http://jams.arakmu.ac.ir/article-1-1798-fa.html
URL: http://jams.arakmu.ac.ir/article-1-1798-fa.html
رضائی مهدی، هنری حسین، زند علی محمد، عارف پور ترابی lمحمد علی. بیان نوترکیب و تخلیص ناحیه 1 فاکتور کشنده باسیلوس آنتراسیس در Escherichia coli و تولید آنتی‌بادی پلی‌کلونال علیه آن در موش سوری. مجله دانشگاه علوم پزشكي اراك. 1391; 15 (9) :51-60
1- دانشگاه جامع امام حسین(ع)
2- دانشگاه جامع امام حسین(ع) ،honari.hosein@gmail.com
2- دانشگاه جامع امام حسین(ع) ،
چکیده: (13436 مشاهده)
زمینه و هدف: سیاهزخم یک بیماری مشترک بین انسان و دام است. عامل ایجاد کننده بیماری، باکتری باسیلوس آنتراسیس میباشد که آنتیژن حفاظتکننده و ناحیه یک فاکتور کشنده (LFD1) ایمونوژنهای قوی این باکتری بوده و همواره به عنوان کاندیدای واکسن علیه باسیلوس آنتراسیس در نظر گرفته شدهاند. هدف این مطالعه بیان و تخلیص LFD1 در باکتری Escherichia coli و تولید آنتی‌بادی پلی‌کلونال علیه آن در موش سوری میباشد. مواد و روشها: در این مطالعه تجربی، ژن LFD1 با جایگاههای برش آنزیمی BamHI و XhoI با واکنش PCR تکثیر و بعد از جداسازی، در وکتور بیانی pET28a(+) همسانهسازی گردید. به منظور بیان ژن، این وکتور به باکتریهای صلاحیتدار E.coli-BL21(DE3)PLysS تراریخت شد. بیان ژن LFD1 تحت القایIPTG انجام و بعد از تخلیص پروتئین با استفاده از کروماتوگرافی تمایلی، آنتیژن حاصل در چهار نوبت به موشهای سوری تزریق شد. آنتی‌بادی پلی‌کلونال تولید شده در سرم موشها اندازهگیری گردید. یافتهها: ژن LFD1 کلون شده در وکتور بیانی pET28a(+) به وسیله PCR، هضم آنزیمی و توالییابی تأیید شد. همچنین پروتئین نوترکیب تولید شده به وسیله SDS-PAGE و لکهگذاری وسترن تایید گردید. در نهایت آنتی‌بادی پلی‌کلونال تولید شده از سرم موش سوری جدا شده و به وسیله تست الایزا ارزیابی و تأیید گردید. نتیجهگیری: با توجه به بیان مناسب، تولید آسان این آنتیژن و تیتر آنتی‌بادی پلی‌کلونال تولید شده علیه آنتیژن LFD1 به دلیل ایمونوژنیسیته آن در موشهای سوری، میتوان آن را به عنوان کاندید واکسن علیه سیاهزخم در نظر گرفت.
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
