Paryan M, Mondanizadeh M, Mohammadi-Yeganeh S, Khansarinejad B. Development and application of a sensitive multiplex real-time RT-PCR for simultaneously detection of HIV-1 and HCV in plasma samples. J Arak Uni Med Sci 2011; 14 (5) :1-10
URL:
http://jams.arakmu.ac.ir/article-1-920-fa.html
پریان مهدی، موندنیزاده مهدیه، محمدی یگانه سمیرا، خوانساری نژاد بهزاد. راه اندازی و به کارگیری یک روش Multiplex Real-time RT-PCR حساس برای تشخیص همزمان ویروس نقص ایمنی انسانی نوع 1 و ویروس هپاتیت C در نمونههای پلاسما. مجله دانشگاه علوم پزشكي اراك. 1390; 14 (5) :1-10
URL: http://jams.arakmu.ac.ir/article-1-920-fa.html
1- ، mparyan@gmail.com
چکیده: (13788 مشاهده)
زمینه و هدف: ویروس نقص ایمنی انسانی نوع 1 و ویروس هپاتیت C از جمله مهمترین عوامل عفونی منتقل شونده از طریق خون محسوب میشوند و از این رو تشخیص صحیح، دقیق و حساس این ویروسها در افراد آلوده و خونهای اهدایی از اهمیت بسیاری برخوردار است. به علت وجود برخی از محدودیتهای روشهای سرولوژیک در تشخیص این عوامل عفونی، هدف این مطالعه استفاده از روشهای مولکولی سریع و حساس همچون Real-time PCR میباشد.
مواد و روشها: در این مطالعه آزمایشگاهی، یک روش Real-time PCR Multiplex خانگی بر مبنای استفاده از رنگ SYBR GreenI راه اندازی شد که در آن با استفاده از آنالیز منحنی ذوب میتوان عفونت منفرد و یا هم زمان ویروس نقص ایمنی انسانی نوع 1 و ویروس هپاتیت C را در نمونههای پلاسمای بیماران شناسایی نمود. آنالیز آماری با استفاده از نرم افزار SPSS نسخه 16 انجام شد
یافتهها: نتایج به دست آمده از انجام واکنشهای مختلف بر روی چندین نمونۀ بالینی نشان داد که حساسیت تجزیهای (آنالیتیکی) روش راه اندازی شده برای ویروس نقص سیستم ایمنی نوع 1 معادل 200 کپی در هر میلی لیتر 200 و برای ویروس هپاتیت C برابر 100 کپی در هر میلی لیتر است. به علاوه نشان داده شد که پرایمرهای طراحی شده برای هر ویروس هیچگونه واکنش متقاطعی با یکدیگر و سایر عوامل مداخله گر ندارند.
نتیجه گیری: با توجه به سطح حساسیت و ویژگی مناسب، کاربرد آسان، هزینه نسبتاً کم و آنالیز سریع نمونهها، این روش میتواند یک روش سریع و مناسب برای تشخیص موثر و آسان ویروس نقص ایمنی انسانی نوع 1 و ویروس هپاتیت C در نمونههای پلاسما باشد.
موضوع مقاله:
عفونی دریافت: 1389/9/2 | پذیرش: 1390/3/11